贾斯汀·塞洛克斯，1971年生于美国华盛顿特区，父母分别为记者和律师。他是小说家保罗·塞洛克斯的侄子。塞洛克斯毕业于著名艺术院校本宁顿大学，获得视觉艺术和戏剧双学位。他的演艺生涯始于1996年的处女作《我枪杀了安迪·沃霍尔》。此后，他活跃于喜剧舞台，并出演了多部影片，包括《阿珠与阿花》、《巴克斯特》和《伤心人俱乐部》等喜剧作品。2000年，他在克里斯蒂安·贝尔主演的《美国精神病人》中初露锋芒。2002年，塞洛克斯出演了卖座商业大片《霹雳娇娃2》。
此外，塞洛克斯还出演了热门电视剧的电影版，如《有糖果的陌生人》和《迈阿密风云》。在导演大卫·林奇的作品《内陆帝国》和《穆赫兰道》中也能看到他的身影。在电视剧领域，他曾在《特区刑警》中饰演警察角色，并在《双面女间谍》、《欲望都市》及《六尺风云》等剧中客串出场。
2006年，贾斯汀·塞洛克斯执导了他的处女作《奉献》，该片在2007年的圣丹斯电影节上公开。同年，他还出演了《蹩脚英语》和《十》两部影片，其中在《十》中饰演基督耶稣。最近，他参与了本·斯蒂勒自导自演的喜剧片《热带惊雷》，并担任该片的编剧之一。