马伊琍，1976年6月29日出生于上海市虹口区，籍贯江苏省南通市如东县，汉族，巨蟹座，B型血，身高164cm。她毕业于上海戏剧学院94级表演系本科，并于1994年正式进入演艺圈。
马伊琍的演艺生涯始于1993年，当时她主演了电影《刘海粟》。1996年，她在电视剧《真空爱情记录》中饰演夏文心，首次获得广泛关注。1998年，她参演了电影《玻璃是透明的》，饰演“小丫子”，并同年出演了未公映的古装电影《孔乙己》。
2000年，马伊琍在电视剧《黑洞》中饰演三陪女，进一步提升了自己的表演事业。2001年，她在电影《西施眼》中饰演施雨，该片在2002年获得美国夏威夷国际电影节评审团大奖及亚洲最佳电影。2002年，她在电视剧《还珠格格Ⅲ之天上人间》中饰演夏紫薇，从而被大众熟知。
2004年，马伊琍在黄磊导演的《天一生水》中饰演混血姑娘明妮。2005年，她在张黎导演的电视剧《锦衣卫》中饰演客印月。2006年，她在《乔家大院》中饰演江雪瑛。2007年，她在赵宝刚导演的《奋斗》中饰演夏琳，进一步提升了自己的知名度。
2008年，马伊琍因拍摄电视剧《为谁心动》剃光头发，凭借影片《江北好人》获得长春电影节最佳女主角。2009年，她与佟大为共同出演了《婚姻保卫战》，并首次在央视播出的《经纬天地》中饰演尚达志的妻子顺儿。
2010年，马伊琍与涂松岩领衔主演了《双城生活》，饰演北京大妞郝京妮，并凭借该剧获得国剧盛典2011年度最佳女演员。2013年，她首当制片人，与丈夫文章合作导演了电视剧《小爸爸》。
2015年，马伊琍出演了公路犯罪片《未择之路》和电视剧《北上广不相信眼泪》。2016年，她与陈建斌领衔主演了《中国式关系》，并在文章执导的谍战剧《剃刀边缘》中饰演女主角。2017年，她在《我的前半生》中饰演罗子君，凭借该剧获得第24届上海电视节“白玉兰奖”最佳女主角。
2018年，马伊琍凭借电影《那些女人》获得第21届上海国际电影节电影频道传媒关注单元最佳女配角奖，并在《未择之路》和《找到你》中饰演重要角色。2019年，她主演了民国探案剧《爱思小姐探案集》，并在《在远方》中与刘烨合作。
马伊琍的主要成就包括：
第24届上海电视节白玉兰奖最佳女主角
第9届中国长春电影节最佳女主角
第21届上海国际电影节-电影频道传媒大奖最受传媒关注女配角
第12届中国电影表演艺术学会金凤凰奖学会奖
第19届华鼎奖中国百强电视剧最佳女主角